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灭活疫苗要先对病毒或细菌进行培养,然后用加热或化学剂将其灭活。
灭活疫苗即可由整个病毒或细菌组成,也可由它们的裂解片段组成为裂解疫苗。
加热或者使用福尔马林溶液都可以使疫苗灭活,不过还有一个问题,那就是无论是制造灭活苗或者是活苗都需要胰酶。
国内不能生产胰酶,必须要从国外进口。
苏国报出的胰酶价格相当的昂贵,若是从苏国进口胰酶,疫苗的生产成本要提高不少,如果说疫苗生产有利润,大部分的利润都要被苏国人拿走。
胰酶是一种助消化酶,主要含胰蛋白酶、胰淀粉酶和胰脂肪酶等,胰蛋白酶能使蛋白转化为蛋白胨,胰淀粉酶使淀粉转化为糊精与糖,胰脂肪酶则使脂肪分解为甘油和脂肪酸。
在中性或弱碱性条件下活性较强。
在肠液中消化淀粉、蛋白质及脂肪,从而起到促进消化和增进食欲的作用。
胰酶主要用于疫苗生产中细胞培养时的细胞解离。
贴壁依赖型动物细胞在培养时都是贴附于固相表面进行生长,一般贴附于培养器皿表面或微载体,医学上称之为贴壁培养。
细胞贴壁后迅速铺展并以有丝分裂的方式进行增殖,并很快进入对数生长期。
数天后就铺满培养表面,并在形成致密的单层细胞后停止增殖,随后进行放大传代培养,此时就需要使用细胞消化液对贴壁细胞进行处理,使之成为单个细胞并且不对其造成损伤,其中酶类细胞消化液主要成分为蛋白水解酶和缓冲保护溶液。
胰蛋白酶能够水解细胞间的沾粘蛋白,释放出单个独立细胞,并且很好的保持细胞的完整性和细胞活性。
此外。
胰酶还可以用于裂解疫苗。
因为疫苗并不着急使用,生物研究所和卫生部都支持国内自己研制胰酶的制取方法。
他们先后向各个有试验条件的试验室做出了协助科研的请求。
六院也是有实验室的,当然也收到了类似的请求。
院长专门找到李平安,让他在没有手术的时候到实验室研究胰酶的制备。
关于胰酶的制备。
李平安是很清楚的。
在后世。
这已经成了医学、微生物学等学科学生要进行的微生物试验之一,而且需要的原料也不复杂,很容易制备。
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李平安自然是愿意接受这个任务的。
他和冉倩打了招呼就去大栅栏那边找了表哥徐海,和屠宰场的其他工作人员打了招呼,说是要用一些猪的胰脏做实验。
屠宰场的工作人员自然是同意的,他们很是配合,还特地让徐海弄了一个刚宰杀的猪胰脏送给李平安。
徐海更是热情。
他还想带着猪胰脏到六院实验室帮着李平安做进一步的处理。
“多谢!”
李平安说道:“我自己就可以处理,不麻烦你了!”
徐海被拒绝之后还有些失望,对李平安说道:“那我就不过去了,回去帮我给姑姑问好!”
李平安点点头带着胰脏离开。
骑着自行车从大栅栏回到六院也不过是用了十几分钟而已。
进入实验室,李平安开始制取胰酶。
取猪胰脏,除去脂肪和结缔组织,切碎,称重约50g,加入5倍体积预冷的pH2。
5乙酸酸化水,捣碎离心rpm,15min用4层纱布过滤得到上清液。
将研细的固体无水氯化钙慢慢加入酶原溶液中,边加边搅拌均匀,使溶液中最终含有0。
1molLCaCl,加入极少量猪胰蛋白酶(约2-5mg),轻轻搅拌均匀。
用5molLNaOH调pH为8。
0,活化4~6小时。
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